鉴定蛋白质的方法高中生物（鉴定蛋白质）

小伙伴们好，最近小跳发现有诸多的小伙伴们对于鉴定蛋白质这个都颇为感兴趣的，那么小跳今天就来为大家梳理下具体的一些信息一起来看看吧。

1、凯氏定氮法

2、凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮含量的方法。即在催化剂的存在下，样品用浓硫酸消化，将有机氮全部转化为无机铵盐，然后铵盐在碱性条件下转化为氨，用水蒸气蒸馏，用过量的硼酸溶液吸收，再用标准盐酸滴定，计算出样品中的氮含量。

3、由于蛋白质中的氮含量相对恒定，可以由氮含量计算出蛋白质含量，因此该方法是一种经典的蛋白质定量方法。

4、缩二脲法

5、缩二脲法是一种用于鉴定蛋白质的分析方法。缩二脲试剂是一种碱性含铜试液，颜色为蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。

6、当底物含有肽键(多肽)时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。浓度可通过比色法分析，紫外-可见光谱中的波长为540nm。识别反应的灵敏度为5-160毫克/毫升。鉴定反应的蛋白质单位为1-10毫克。

7、苯酚试剂法

8、6个试管分别贴上标签，前5个试管加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一个试管加入待测蛋白溶液，不加标准蛋白溶液，室温放置30分钟。第一个不含蛋白溶液的试管作为空白对照，在650nm波长处测定每个试管中溶液的吸光度值。

9、紫外线吸收法

10、大多数蛋白质在280nm波长处有特征最大吸收，这是由于蛋白质中存在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸，可用于测定含量为0.1 ~ 0.5 mg/ml的蛋白质溶液。

11、取9支试管，分别贴上标签。在前8个试管中加入不同浓度的标准蛋白溶液，第一个试管不加标准蛋白溶液，最后一个试管不加标准蛋白溶液加入待测蛋白溶液。每个试管中的液体总量是一致的，通过加入蒸馏水来补足。将液体混合均匀，在280nm波长下进行比色，记录吸光度值。

12、考马斯亮蓝法

13、考马斯亮蓝显色法的基本原理是蛋白质能与考马斯亮蓝G-250定量结合。当考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合时，其可见光最大吸收峰从465nm变为595nm。

14、当考马斯亮蓝G-250过量且浓度不变时，溶液中蛋白质的浓度不同时，不同量的考马斯亮蓝G-250会从吸收峰在465nm的形式变为吸收峰在595nm的形式，这种变化有一定的定量关系。

15、一般来说，当溶液中蛋白质的浓度增加时，显色溶液在595nm处的吸光度基本上可以线性增加，因此可以用考马斯亮蓝G-250来测定溶液中蛋白质的含量。

本文到此结束，希望对大家有所帮助。