革兰氏染色法（革兰氏染色法）

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1、革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。

2、未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。

3、染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。

4、革兰氏染色属复染法，即将标本固定后，先用结晶紫染色1分钟后水洗，然后加革兰碘液媒染一分钟后用酒精脱色，再用稀释石炭酸复红复染。

5、染色后除可以看到细菌形态外，还可将细菌分为两大类，即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G﹢）。

6、被酒精脱色复染成红色者为革兰氏阴性菌（Gˉ）。

7、革兰氏染色原理尚不肯定，可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关。

8、致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。

9、百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性。

10、所以根据细菌的革兰氏染色性质，可以缩小鉴定范围，有利于进一步分离鉴定，以对疾病做出诊断。

11、又由于各种抗生素的抗菌谱不同，革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。

12、革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定。

13、2）草酸铵结晶紫染1分钟。

14、3）自来水冲洗。

15、4）加碘液覆盖涂面染1分钟。

16、5）水洗，用吸水纸吸去水分。

17、6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。

18、7）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。

19、干燥，镜检。

20、染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。

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